banner
Дом / Блог / хромосома
Блог

хромосома

Jun 22, 2023Jun 22, 2023

Биология связи, том 6, Номер статьи: 867 (2023) Цитировать эту статью

212 Доступов

2 Альтметрика

Подробности о метриках

Ревень — собирательное название различных многолетних растений из рода Rheum L. и семейства Polygonaceae. Это одна из самых древних, широко используемых и важных трав в традиционной китайской медицине. Ревень является основным источником антрахинонов, но то, как они синтезируются, остается в значительной степени неизвестным. Здесь мы создаем сборку геномной последовательности одного важного лекарственного ревеня R. tanguticum на уровне хромосом, 2,76 ГБ собрано в 11 хромосом. Геном сформирован двумя недавними событиями дупликации всего генома и недавними выбросами ретротранспозонов. Метаболические анализы показывают, что основные антрахиноны в основном синтезируются в его корнях. Транскриптомный анализ выявляет модуль коэкспрессии с высокой корреляцией с биосинтезом антрахинона, который включает ключевые гены халконсинтазы. Один ген CHS, четыре гена CYP450 и два гена BGL, участвующие во вторичном метаболизме, демонстрируют значительно повышенные уровни экспрессии в корнях по сравнению с другими тканями и сгруппированы в модуле совместной экспрессии, что означает, что они также могут выступать в качестве генов-кандидатов для биосинтеза антрахинона. Это исследование дает ценную информацию о генетических основах биосинтеза антрахинона, что будет способствовать улучшению методов селекции и агрономических свойств ревеня в будущем.

Ревень — древнее и важное растение с толстыми корнями, полыми и прямостоячими стеблями и маленькими бело-зелеными или пурпурно-красными цветками, собранными вдоль его ветвей1. Название «Ревень» охватывает около 60 видов растений рода Rheum L. семейства Polygonaceae2. Ревень в основном использовался в лечебных целях в Азии, хотя некоторые съедобные виды ревеня используются в Европе и на Ближнем Востоке. Из них черешок R. rhabarbarum обычно используется для приготовления пирога с ревенем, который является традиционным десертом в Соединенных Штатах, а также популярен на Ближнем Востоке и в Канаде. Кроме того, корни и корневище R. tanguticum Maxim. и два других вида (R. officinale Baill. и R. palmatum L.) были официально включены в Китайскую и Корейскую фармакопеи под общим названием «Да хуанг» из-за его слабительного действия3. Среди трех лекарственных ревеней R. tanguticum Maxim. (рис. 1а) обладает отличной толерантностью к альпийским условиям. В дикой природе R. tanguticum Maxim. Распространен преимущественно на Цинхай-Тибетском нагорье и примыкает к опушкам леса (долинам или кустарниковым лугам) на высотах от 2300 до 4200 м4. Это важное лекарственное растение на северо-западе Китая (Ганьсу, Цинхай и Тибет), которое приносит пользу местной экономике.

Ареал R. tanguticum. б Обзор генома R. tanguticum. Разные дорожки (движущиеся внутрь) обозначают (I) хромосомы; (II) плотность элементов Gypsy в скользящих окнах размером 500 кб (минимум–максимум, 0–1,0); (III) плотность элементов Copia в скользящих окнах размером 500 кб (минимум–максимум, 0–1,0); (IV) содержание GC в скользящих окнах размером 500 кб (минимум–максимум, 0–0,5); (V) плотность повторов в скользящих окнах размером 500 т.п.н. (минимум–максимум, 0–1,0); (VI) плотность генов в скользящих окнах размером 500 т.п.н. (минимум–максимум, 0–50); (VII) плотность некодирующей РНК в скользящих окнах размером 500 т.п.н. (минимум–максимум, 0–30); (VIII) идентифицировали синтенные блоки.

Современные исследования ревеня более научным и строгим образом определили его химические составляющие5,6, фармакологическую активность7,8 и функциональные механизмы2,9. Обширные фотохимические исследования привели к выделению и идентификации более 120 соединений из корней и листьев ревеня, которые предоставляют химические доказательства его фармакологического действия10. Основными биологически активными соединениями ревеня являются различные фенольные соединения, включая антрахиноны, антроны, стильбены, флавоноиды, диантроны, дубильные вещества, полифенолы и хромоны2,11. Хотя ревень является основным источником антрахинонов, наиболее выраженные фармакологические эффекты ревеня являются результатом совместного действия нескольких антрахинонов2. Антрахиноны являются активными компонентами многих традиционных лекарственных растений, которые давно известны своим слабительным действием2,12. Например, в рандомизированном двойном слепом плацебо-контролируемом клиническом исследовании, проведенном Neyrinck et al.13, они сообщили, что добавление сырого экстракта, богатого антрахиноном, способствует выработке бутирата бактериями и короткоцепочечными жирными кислотами, которые являются эффективным слабительным средством. для лечения хронических запоров. Они также продемонстрировали, что ежедневный пероральный прием экстракта ревеня в течение 30 дней безопасен даже в более высоких дозах (25 мг в день в пересчете на реин). Другое рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое исследование показало, что капсулы антрахинонов использовались как безопасное и эффективное лекарство и продемонстрировали очевидный эффект при желтухе у 80 пациентов с иктерогепатитом14. Кроме того, антрахиноновые производные ревеня: эмодин15, алоэ-эмодин16, реин17, фисцион18 и хризофанол19 являются основными биологически активными компонентами, убедительно продемонстрировавшими свои способности проявлять гепатопротекторную, нефропротективную, противовоспалительную, антиоксидантную, противораковую и противомикробную активность, что поддержать обоснование некоторых его потенциальных медицинских применений. Однако необходимы дополнительные исследования его механизмов, биодоступности и безопасности. Кроме того, современное клиническое и коммерческое использование антрахинонов также создало острую потребность в его биосинтезе вместо естественной экстракции из растений.

0.97) within it. These results indicate that this CHS gene had high connectivity in the “turquoise” module and was therefore expected to play an important role in the biosynthesis of anthraquinones (Fig. 4c)./p>20. Clean Hi-C data were mapped to contig sequences by BWA-MEM (0.7.10-r789)67, and valid interaction pairs were extracted. Based on those chromatin interactions, 3D-DNA (v.180922)68 was employed to automatically cluster, order, and orient the contigs into pseudo-chromosomes. Juicebox69 was used to visualize the chromatin interactions among the assembled pseudo-chromosomes, and then we manually corrected and validated the obvious Hi-C assembly errors to generate the final chromosome assembly./p>30%. LTR-RTs with alignments with the “GAG” (Capsid protein), “AP” (Aspartic proteinase), “INT” (Integrase), “RT”, and “RH” (RNaseH) domains were regarded as intact LTR-RTs. Using the LTR sequences (5’LTR or 3’LTR) from intact LTR-RTs, a nucleotide BLAST search was performed against the genome to find potential solo-LTRs. The false solo-LTRs were further filtered by following these criteria: (a) LTRs which overlapped with truncated LTR-RTs; (b) LTRs located within 5 kb of the scaffold edge; (c) LTRs with <0.7 coverage and <0.7 identity cutoff; (d) LTRs identified within 500 bp either side of a gap sequence in the assemblies. To detect truncated LTR-RTs, all LTR-RT sequences reported by LTR-FINDER (v.1.07) were blasted against their genomes, and alignments with >80% coverage and >60% identity were considered to correspond to the presence of truncated LTR-RTs./p>1 and FDR significance score (Padj) <0.05. DEGs were subjected to KEGG and GO enrichment analysis using clusterProfiler106. Gene co-expression networks were constructed using the WGCNA107 package in the R software. The core DEGs were further divided into three modules using WGCNA, and correlations of each module with anthraquinone contents were calculated. Module-trait associations were estimated using the correlation between the module eigengene and root/control treatments. A signed network was constructed in WGCNA with specific parameter settings of power = 9, networkType = “signed”, TOMType = “unsigned”, and minModuleSize = 200./p>40% identity value, and >40% coverage). The candidate CHS genes were further classified by integrity, and the CHS genes with one or two fragmentary domains were identified as CHS-like genes. For the identification and classification of CYP450 genes, hmmsearch108 was used by PF00067 from the Pfam database. We also downloaded the Arabidopsis CYP450 protein sequences from the website (http://www.p450.kvl.dk/). These proteins were then used as query sequences against the R. tanguticum protein database using BLASTP with same parameters as above. The classification of the CYP450 genes was performed by alignment with the CYP450 database using standard sequence similarity cut-offs, with definite standards of 97%, 55%, and 40% for allelic, subfamily, and family variants, respectively. According to the standardized CYP450 nomenclature, CYP450s were divided into A-type and non-A-type CYP450s, and phylogenetic analysis of CYP450 genes was performed for A-type and non-A-type CYP450s. The protein sequences of BGL members were downloaded from TAIR (http://www.arabidopsis.org/tools/bulk/sequences/index.jsp). To identify BGL family members, PF00232 from the Pfam database was used to query all putative protein sequences of R. tanguticum using hmmsearch. Genes from each gene family were aligned using MAFFT109, and the resulting alignment was then delivered to IQ-TREE to construct a phylogenetic tree./p>